Описание
Набор pcDNA ™ 3.3-TOPO® TA Cloning® предназначен для обеспечения исключительно высоких уровней экспрессии трансгена в адгезивных клетках, а также в системах суспензионных клеток FreeStyle ™ MAX CHO и FreeStyle ™ MAX 293. Набор pcDNA3.3 ™ -TOPO® TA Cloning® поставляется с адаптированным к TOPO® плазмидным вектором, всеми реагентами для клонирования и компетентными клетками One Shot® TOP10. Вектор pcDNA ™ 3.3-TOPO® предлагает следующие преимущества:
• TOPO® адаптирован для клонирования продуктов ПЦР с эффективностью> 85%
• экспрессия гена высокого уровня в широком диапазоне клеток млекопитающих из-за нативного цитомегаловируса (ЦМВ) немедленного раннего промотор / энхансер (672 п.о.)
• Вектор идеально подходит для крупномасштабной экспрессии белка
• Генерация нативного белка без посторонних аминокислот
Вектор pcDNA ™ 3.3-TOPO® также включен в систему OptiCHO ™ Antibody Express для клонирования и экспрессии цепей легких и тяжелых антител.
Спецификации
Промоутер:
|
CMV
|
Ключевые функции:
|
Условная экспрессия, производство белков
|
Протеиновый тег или синтез:
|
Untagged
|
Способ доставки:
|
трансфекция
|
Метод клонирования:
|
TOPO®-TA
|
Агент выделения (эукариотический):
|
Генетицин® (G-418)
|
Тип вектора:
|
рсДНК
|
Учредительная или индуцируемая система:
|
учредительный
|
Линия продуктов:
|
TOPO®, pcDNA ™
|
Размер товара:
|
20 реакций
|
Содержимое и хранение
Вставка 1 (хранить при -20 ° C)
• 20 мкл вектора pcDNA ™ 3.3-TOPO®, адаптированный TOPO® (5-10 нг / мкл)
• 100 мкл 10X ПЦР-буфер
• 10 мкл dNTP-смеси
• 50 мкл раствора соли
• 1 мл Стерильная вода
• 10 мкл Контрольный образец ПЦР (50 нг / мкл)
• 10 мкл Контрольные ПЦР-праймеры (100 нг / мкл каждый)
• 20 мкл CMV Первичная секвенирующая грунтовка (100 нг / мкл)
• 20 мкл TK polyA Обратный последовательный праймер ( 100 нг / мкл)
• 10 мкл pcDNA ™ 3,3-TOPO® / lacZ Дисперсионная контрольная плазмида (500 нг / мкл)
Вставка 2 (хранить при -80 ° C)
• 11 × 50 мкл TOP10 E. coli
• 50 мкл pUC19 Контрольная ДНК (10 мкг / мкл)
• 6 мл Средство SOC Medium